原位雜交是一種重要的生物技術(shù)手段，主要利用DNA雙鏈分子和特異性Probe分子建立原位雜交反應(yīng)，當(dāng)Probe分子靠近DNA雙鏈時，Probe分子上的特異性引物將在DNA雙鏈上的特異序列處引發(fā)雙鏈鏈接，從而形成一個叫做雜交的物料，然后利用特異的標(biāo)記物及檢測儀器，反映其存在與否及定量內(nèi)容。
原位雜交是利用
原位雜交儀將特異性的核酸直接定量地檢測到實(shí)時熒光發(fā)射，從而將基因表達(dá)水平空間化地進(jìn)行定量檢測，集成了變性/雜交、雜交、多步運(yùn)行三種操作模式，適用于各種原位雜交實(shí)驗(yàn)，是一種重要的實(shí)時定量PCR檢測方法。
儀器特點(diǎn)：
?。?）敏感性高：非特異性污染非常低，可以檢測非常少量的mRNA、DNA等物質(zhì)，具有很強(qiáng)的敏感性。
?。?）靈敏度高：由于具有單一分子靈敏度，比傳統(tǒng)的定量PCR方法更加靈敏，可以快速檢測微量物質(zhì)的變化情況。
?。?）節(jié)省時間：與傳統(tǒng)的PCR定量方法相比，原位雜交儀不需要建立分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，只需在準(zhǔn)備好的裝置上放置樣品和Probe，就可以節(jié)省大量的實(shí)驗(yàn)時間。
?。?）精確度高：可以精確地測量和檢測具有特異性標(biāo)記或Probe物質(zhì)的變化，可以更準(zhǔn)確地定量和計算細(xì)胞內(nèi)的mRNA和DNA含量，確保定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
?。?）高通量：在同一儀器上可以對多種不同的環(huán)境或細(xì)胞樣品進(jìn)行同步檢測，實(shí)現(xiàn)大量樣品、少量試驗(yàn)、快速實(shí)驗(yàn)，從而實(shí)現(xiàn)了高通量檢測和實(shí)驗(yàn)效率。
原位雜交儀作為一種重要的定量PCR方法，已深受臨床、醫(yī)學(xué)和生物學(xué)研究領(lǐng)域的青睞，在基因組學(xué)、藥物研發(fā)、新藥篩選等領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。它不僅可以對基因表達(dá)水平進(jìn)行定量檢測，而且可以檢測少量物質(zhì)的變化情況，更能夠精確地測量和計算DNA和mRNA的含量，具有非常重要的臨床研究價值。
